Scenari applicativi
* **Ricerca sul meccanismo del percorso della miosina:** In quanto proteina strumento del recettore esca ActRIIB, viene utilizzata negli esperimenti cellulari in vitro della via di segnalazione della famiglia TGF- per confrontare i cambiamenti fenotipici nelle cellule dopo la neutralizzazione di diversi ligandi e chiarire i meccanismi di regolazione della crescita muscolare.
* **Ricerca su modelli animali sull'atrofia muscolare:** modelli animali di distrofia muscolare di Duchenne (DMD), sarcopenia-correlata all'età e atrofia muscolare correlata alla cachessia-vengono utilizzati per osservare la massa corporea magra, l'area della sezione trasversale-delle fibre muscolari e i relativi indicatori della funzione motoria. Questa direzione era anche l'obiettivo originale per lo sviluppo clinico e tutti i dati validi provengono da animali e da campioni clinici iniziali.
* **Ricerca sulla riparazione delle lesioni muscolari:** modelli animali di contusione e stiramento dei muscoli scheletrici vengono utilizzati per osservare la rigenerazione muscolare, l'attivazione delle cellule satellite e i processi di rimodellamento dei tessuti, valutando contemporaneamente i cambiamenti negli indicatori relativi al sistema vascolare-.
* **Ricerca sul metabolismo osseo:** Il percorso ActRIIB è coinvolto anche nel rimodellamento osseo. Negli esperimenti sugli animali è possibile osservare cambiamenti nella densità minerale ossea, fornendo una comprensione fondamentale del meccanismo di collegamento muscolo-osseo.
Esperimenti di controllo delle proteine dello strumento: gruppi sperimentali paralleli vengono spesso creati con Follistatina 288 e Follistatina 344 per confrontare le differenze nell'efficacia in vivo causate da diversi profili di cattura del ligando. Questo è un protocollo di controllo ad alta-frequenza per la miostatina.
Metodi di utilizzo della ricerca
Procedura di ricostituzione:
ACE-031 è una proteina macromolecolare di fusione Fc e la sua conformazione è molto più sensibile all'ambiente rispetto a quella dei normali piccoli peptidi.
Dopo aver rimosso le fiale liofilizzate dalla conservazione criogenica, lasciarle riscaldare completamente a temperatura ambiente prima di aprire il tappo di gomma per evitare la condensa e la denaturazione delle proteine. Utilizzare la soluzione tampone sterile consigliata dal produttore per la ricostituzione; l'uso diretto di acqua pura non è raccomandato poiché interromperebbe direttamente la conformazione spaziale della proteina.
Proteggere dalla luce durante tutta la procedura. Ridurre al minimo il tempo di funzionamento a temperatura ambiente. Evitare agitazioni vigorose; sciogliere la polvere ruotando lentamente la fiala. La comparsa di schiuma indica la denaturazione delle proteine. Dopo la ricostituzione, aliquotare in base alla quantità utilizzata in un singolo esperimento per ridurre al minimo i cicli ripetuti di congelamento-scongelamento e l'esposizione all'aria.
Condizioni di conservazione
Polvere liofilizzata non ricostituita
Conservazione-a lungo termine: conservare a -20 gradi, sigillato e protetto dalla luce, con un essiccante per prevenire l'assorbimento di umidità. In queste condizioni può mantenere l'attività biologica per un tempo relativamente lungo.
Utilizzo a breve-termine: conservare in frigorifero a 2-8 gradi, al riparo dalla luce. Adatto per materie prime che devono essere utilizzate in esperimenti entro poche settimane. Non conservare a temperatura ambiente; le alte temperature causeranno direttamente l'inattivazione irreversibile della proteina di fusione. Se la polvere si raggruma o cambia colore, si tratta di denaturazione delle proteine e non deve essere utilizzata negli esperimenti.
Soluzione di lavoro proteica ricostituita
Le soluzioni proteiche ricostituite hanno scarsa stabilità. Dovrebbero essere suddivisi in aliquote e conservati congelati a -20 gradi o -80 gradi. La conservazione a -80 gradi ha una durata di conservazione più lunga; a -20 gradi, si consiglia di utilizzarlo entro un mese. Il numero di cicli di congelamento-scongelamento deve essere rigorosamente controllato fino a un massimo di uno. Cicli ripetuti di congelamento-scongelamento distruggono direttamente la struttura dimerica della proteina di fusione Fc, riducendone significativamente l'attività biologica.
Se temporaneamente refrigerati a 2-8 gradi, gli esperimenti devono essere completati entro 48 ore. Se la soluzione diventa torbida o sviluppa precipitati flocculanti, eliminarla immediatamente.
Domande frequenti
D: Qual è la quantità minima dell'ordine? R: La quantità minima dell'ordine è di 10 bottiglie/set.
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R: Purezza standard 99%.
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